(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210966541.4 (22)申请日 2022.08.12 (71)申请人 青岛科技大 学 地址 266000 山东省青岛市崂山区松岭路 99号 (72)发明人 齐昀坤　杜姗姗　贾世玺　杨立霞　 (51)Int.Cl. A61K 47/64(2017.01) A61K 31/519(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种抗肿瘤多肽偶联药物的制备及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种抗肿瘤多肽偶联药物及 其应用。 该多肽偶联药物的分子序列为： MTX ‑ Gly‑Phe‑Leu‑Gly‑Gly‑Ile‑Gly‑Ala‑Val‑Leu‑ Lys‑Val‑Leu‑Thr‑Thr‑Gly‑Leu‑Pro‑Ala‑Leu‑ Ile‑Ser‑Trp‑Ile‑Lys‑Arg‑Lys‑Arg‑Gln‑Gln‑ NH2， 其中与MTX连接的Gly ‑Phe‑Leu‑Gly序列可 被组织蛋白酶 ‑B等切割。 本发明提供的抗肿瘤多 肽具有膜 穿透性， 以其作为小分子抗肿瘤药的载 体制备多肽偶联药物， 能够促进抗肿瘤药物穿透 肿瘤细胞的细胞膜， 并完成小分子药物的释放， 进行肿瘤的治 疗。 权利要求书1页 说明书8页 附图6页 CN 115317622 A 2022.11.11 CN 115317622 A 1.一种多肽偶联药物的制备及其作为抗肿瘤药物的应用， 其特征在于蜜蜂毒素抗肿瘤 多肽Melittin和MTX细胞毒性药物通过 连接子GFLG连接 。 2.根据权利要求1所述的多肽偶联药物， 其特征在于， 所述多肽偶联药物具有如式A所 示结构： 3.根据权利要求2所述Peptide为蜜蜂毒素Melittin其氨基酸序列为： Gly ‑Ile‑Gly‑ Ala‑Val‑Leu‑Lys‑Val‑Leu‑Thr‑Thr‑Gly‑Leu‑Pro‑Ala‑Leu‑Ile‑Ser‑Trp‑Ile‑Lys‑Arg‑ Lys‑Arg‑Gln‑Gln。 4.根据权利要求2所述的多肽偶联药物， 其特征在于， 所述细胞毒性药物为肿瘤化疗药 物甲氨蝶呤(methot rexate,MTX)。 5.根据权利要求2所述的多肽偶联药物， 其特征在于， 所述连接子为甘氨酸 ‑苯丙氨酸 ‑ 亮氨酸‑甘氨酸， Gly ‑Phe‑Leu‑Gly。 6.根据权利要求1所述的应用为抗肿瘤作用药物， 其特征在于该多肽偶联药物可应用 于包括肝癌、 卵巢癌和淋巴癌等癌症的相关治疗过程中。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115317622 A 2一种抗肿瘤多肽偶联药物的制备及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及蛋白多肽药物领域， 特别是肝癌、 卵巢癌和 淋巴癌治疗过程中的所涉 及的抗肿瘤药物领域， 具体涉及一种多肽和MTX 药物的偶联及其应用。 背景技术 [0002]癌症已发展为困扰全球的一个重大的健康问题， 是全球范围内导致人类死亡的主 要原因之一。 据世界卫生组织统计， 2018年接近1000万人死于癌症。 更为严重的是， 世界上 新增癌症病例以每年接近两千万速度增长， 仅2020年新增癌症病例达1930万例， 死亡病例 接近1000万例。 [0003]癌症的治疗方法有很多， 例如化学疗法、 放射疗法、 免疫疗法和手术切除等方法。 在这些治疗方法中， 手术切除和放射疗法经常被用于非转移 性癌症的治疗， 抗癌药物(化学 疗法、 激素)经常被用于转移性癌症的治疗。 [0004]小分子在代谢稳定性、 膜渗透性等方面具有显着优势， 但也具有更高的脱靶效应， 因此具有更高的毒性 风险。 [0005]和其他小分子类药物相比， 肽类药物有一些独特的优势： 肽类分子 的潜在毒性低 于小分子、 相对较少的脱靶副反应等。 [0006]肽‑药物缀合物(Peptide ‑drug conjugates,PDC)是一种新型的分子药物递送系 统， 一般由多肽、 共价连接子和有效载荷三部 分组成。 通常药物通过共价连接子与多肽的结 合后， 赋予多肽和药物的双向功能， 能够起到促进药物的杀伤或靶向作用， PDC药物是一种 有前景的癌症治疗方式。 [0007]蜜蜂毒素Melittin是从欧洲蜜蜂毒液中提取出来的生物活性多肽。 蜜蜂毒素 Melittin  是一种含有26个氨基酸残基的细胞穿透性α 螺旋肽。 Melittin能够产生多靶点的 抗肿瘤作用， 包括破坏细胞膜、 抗增殖、 抗侵 袭和抗转移等作用。 [0008]甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是一种常被用于治疗白血病的药物， 但是其耐药性 等限制了它的进一 步应用。 另外， MTX的低细胞摄取率是MTX癌症治疗过程中的一大挑战。 [0009]共价连接子包含的类型多样， 包括脂肪链、 聚乙二醇、 氨基酸等诸多类型。 其中， 氨 基酸是化学合成 中最常用的共价连接子之一。 GFLG四肽序列已被广泛应用于组织蛋白酶   ‑ B存在条件 下可被切割的间隔区， GFLG四肽间隔区在分子递送系统中最为常见， 能够实现在 肿瘤环境中组织蛋白酶 ‑B的定点切割， 从而发挥分子递送系统中的共价连接 子作用。 [0010]针对MTX低细胞摄取率这一不足， 我们设计了MTX 的多肽偶联药物。 MTX通过  GFLG 和蜜蜂毒素Melittin连接， 构成了以Melittin多肽为载体、 MTX作为有效载荷的药物分子递 送系统。 其中， MTX和多肽中的甘氨酸通过酰胺键实现化学合成， 从而成功构建了  MTX‑ GFLG‑Melittin分子递送系统。 [0011]固相多肽合成(SPPS)是目前合成天然多肽和非天然多肽的主要应用方法。 固相多 肽合成中常用的缩合体系如HCTU/DIPEA、 HATU/HOAt /DIPEA和DIC/HOB t。 这些缩合体系所使 用的温度条件一般为3 0℃， 温度相对来说较低， 氨基酸的缩合反应时间相对较长 。说　明　书 1/8 页 3 CN 115317622 A 3