(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211256146.3 (22)申请日 2022.10.13 (71)申请人 陈晓杰 地址 471023 河南省洛阳市洛龙区开元 大 道263号 (72)发明人 陈晓杰　 (74)专利代理 机构 北京科创易佰知识产权代理 事务所(普通 合伙) 16113 专利代理师 路忠琴 (51)Int.Cl. C07K 7/02(2006.01) C07K 1/04(2006.01) C07K 1/06(2006.01) A61K 38/08(2019.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种抗肿瘤活性多肽衍生物及其制备方法 与应用 (57)摘要 本发明涉及一种抗肿瘤活性多肽衍生物及 其制备方法与应用， 属于多肽的技术领域所述的 多肽衍生物， 其具有如下式( Ⅰ)结构： 本发明还提供了制备上述多肽衍生物的方法以 及其在制备抑制肿瘤细胞药物中的应用。 本发明 涉及的多肽衍生物长度短， 易被肿瘤组织吸收， 具有前导肽的特性。 本发明涉及的多肽衍生物能 够自由进入肿瘤细胞并发挥一定的抑制肿瘤细 胞增殖的作用。 本发明的特异性多肽衍生物导向 物弥补了多肽化 合物在食管癌领域的欠 缺。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 115490754 A 2022.12.20 CN 115490754 A 1.一种多肽衍 生物， 其特 征在于， 具有如下式( Ⅰ)结构： 2.一种制备如权利要求1所述的多肽衍 生物的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)合成顺序： 从C端到N端； (2)取树脂放入反应器中， 加入二氯甲烷溶胀半小时， 然后过滤二氯甲烷， 加入序列中 第一个氨基酸Fmoc ‑Arg(pbf) ‑OH、 DIEA、 DMF和二氯甲烷， 用氮气鼓泡反应60min； 然后加入 甲醇， 反应半小时， 抽掉反应液， 用DMF和甲醇洗净； (3)加入哌啶去除Fmoc保护基， 洗净， 茚三酮检测； (4)往反应器中加入序列中第二个氨基酸Fmoc ‑Ser(tBu)‑OH、 HBTU和DIEA， 氮气鼓泡反 应半小时， 抽掉液体， 用DMF和甲醇洗净， 茚三酮检测； (5)按照步骤(3)和(4)的方式依次加入序列中氨基酸， 抽掉液体， 用DMF洗净， 茚三酮检 测， 其中， Glu侧链带有保护基OtBu； A rg侧链带有保护基Pbf， Ser侧链带有保护基tBu； (6)加入5 ‑FITC(异硫氰酸 荧光素酯)， 再加入DIEA， 最后加入DMF 溶解， 避光振荡45mi n； (7)将树脂用氮气吹干后， 从反应柱中取下并称取重量， 倒入烧瓶中， 然后往烧瓶中加 入95％TFA切割液， 震荡反应2h， 将多肽衍生物从树脂载体上裂解下来并去除氨基酸的侧链 保护基团； (8)滤掉树脂， 得到滤液， 然后向滤液中加入乙醚， 析出粗产物， 然后离心， 清洗得到多 肽衍生物粗品； (9)将多肽衍 生物粗品通过制备 液相进行提纯， 在冻干 机中浓缩， 得式(Ⅰ)化合物。 3.如权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述步骤(2)中， Fmoc ‑Arg(pbf) ‑OH与DIEA的 摩尔比为1:2。 4.如权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中， 序列中第二个氨基酸与序列 中第一个氨基酸与HBT U的摩尔比为2:1:2。 5.如权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述步骤(6)中， 所述5 ‑FITC与Fmoc ‑Arg (pbf)‑OH的摩尔比为3:1； 所述DIEA与Fmoc ‑Arg(pbf)‑OH的摩尔比为10:1。 6.如权利要求1所述的多肽衍 生物在制备抑制肿瘤 细胞药物中的应用。 7.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述的肿瘤细胞为食管鳞癌细胞KYSE30、 KYSE150和KYSE45 0。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115490754 A 2一种抗肿瘤活性多肽 衍生物及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明涉及多肽的技术领域， 具体涉及一种抗肿瘤活性多肽衍生物及 其制备方法 与应用。 背景技术 [0002]癌症已成为工业化国家的主要死亡原因。 国家癌症中心(中国)最新数据显示， 食 管癌病例在主要癌症中排名第五， 2016年因预后差、 早期诊断率低， 导致近20万人死亡。 风 险最高、 最常见的病理类型是食管鳞状细胞癌(ESCC)， 近十年来， ESCC的发病率略有下降， 但仍处于较高水平， 由于ES CC患者的高复发率和转移 率， 其预后仍然较差。 目前食管癌的治 疗缺乏有效的靶向治疗， 这是造成5年生存率低的原因之一。 目前研究 的所有多肽导向物对 食管癌效果甚微， 主要原因在于没有有效靶向食管癌细胞膜上的特异性表达受体， 在食管 癌细胞中不能产生有效的药物浓度。 [0003]尽管标准治疗在抑制生长和消除肿瘤方面取得显著效果， 但由于大多数应用药物 对恶性组织的选择性差， 造成严重的副作用。 因此， 在不影响健康组织的情况下对肿瘤细胞 进行特异性处理是目前癌症治疗的主要目标。 近年的研究表明， 肿瘤细胞表面高表达肽类 受体， 这一发现使得一些小分子的多肽可被作为导向物， 通过配体和受体特异性结合的方 式用于靶向药物递送系统。 目前多肽在介导靶向药物递送系统中的表现优秀， 受到人们广 泛的关注和研究。 由于小肽片段及其受体的结合特性， 可增加药物在肿瘤细胞中的富集， 降 低药物毒性和不良反应， 因此 可以被认为是选择性肿瘤治疗的有前途的靶点。 [0004]多肽小于100个氨基酸分子组成， 相对分子质量低于10000， 具有低毒、 靶向性、 无 免疫原性、 良好的生物相容性和治疗效果等特点。 目前已在临床上应用的肽有谷胱甘肽(3 肽)、 胸腺五肽(5肽)、 奥曲肽(8肽)、 催产素(9肽)、 环孢素A(11肽)、 生长抑素(14肽)等。 目前 研究的所有多肽导向物对食管癌效果甚微， 主要原因在于 没有有效靶向食 管癌细胞膜上的 特异性表达受体， 在食管癌细胞中不能产生有效的药物浓度。 我们与强耀生物科技有限公 司合作进 行了相关多肽衍生物的开发， 把得到的多肽衍生物进行了一系列抗肿瘤活性的研 究。 发明内容 [0005]针对现有技术的上述不足， 本发明提供一种抗肿瘤活性多肽衍生物及 其制备方法 与应用， 以解决上述 技术问题。 [0006]第一方面， 本发明提供一种多肽衍 生物， 其具有如下式( Ⅰ)结构：说　明　书 1/4 页 3 CN 115490754 A 3