(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211149467.3 (22)申请日 2022.09.21 (71)申请人 南京农业大 学 地址 211225 江苏省南京市溧水区白马镇 国家农业科技园南京农业大 学基地 (72)发明人 师亮　董浩然　陈慧　武毅　 徐燕灵　武圣博　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 徐冬涛　李晓峰 (51)Int.Cl. A61K 36/07(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 3/06(2006.01)A61P 9/08(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 37/04(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 31/12(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12P 19/60(2006.01) C12P 17/06(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 一种提高桑黄 菌丝体中黄酮含量的方法 (57)摘要 本发明公开了一种提高桑黄菌丝体中黄酮 含量的方法， 该方法为向桑黄 液体发酵培养基中 加入乙酸进行处理以提高桑黄菌丝体中黄酮的 含量。 通过在桑黄菌丝液体培养基中加入适量乙 酸可以有效提高菌丝黄酮的含量， 当乙酸处理浓 度为9.50mM时， 处理时间85.56h， 总黄酮含量较 对照组增加30.4％； 黄酮不单单是一种物质， 包 含多种黄酮类物质， 不同物质对应功能也不同， 并且通过HPLC法分析黄酮类化合物中的重要活 性黄酮类物质， 结果表明： 当乙酸处理浓度为 9.50mM时， 处理时间85.56h， 异槲皮苷， 芦丁， 水 仙苷， 山奈酚 ‑3‑O‑芸香糖苷， 槲皮素， 樱花素含 量较对照组分别提高68.6％， 75％， 65％， 73％， 57％， 87％。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115475184 A 2022.12.16 CN 115475184 A 1.乙酸在提高桑黄 菌丝体黄酮含量中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 向桑黄液体发酵培养基中加入乙酸进行处 理以提高桑黄 菌丝体中黄酮的含量。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述的乙酸在桑黄液体发酵培养基中的添 加浓度为： 7 ‑10mM； 优选为9.5 0mM。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述乙酸处理的时间为24 ‑95h， 优选为24 ‑ 90h， 最优选为85.5 6h。 5.根据权利要求1或2所述的应用， 其特征在于， 所述的乙酸配制成乙酸溶液， 然后通过 滤器过滤除菌后加入到桑黄液体发酵培 养基中。 6.一种提高桑黄菌丝体中黄酮类含量的发酵方法， 其特征在于， 向桑黄液体发酵培养 基中加入乙酸进行处 理以提高桑黄 菌丝体中黄酮的含量。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于， 该方法具体为： 将桑黄菌种活化后制备种 子液， 将种子液接种入桑黄液体发酵培养基中发酵培养， 发酵过程中向所述的桑黄液体发 酵培养基中添加乙酸进行乙酸处 理以提高桑黄 菌丝体中黄酮的含量。 8.根据权利要求7 所述的方法， 其特 征在于， 所述菌种 活化的过程为： 将保存在PDA固体培养基的桑黄菌种接入CYM固体培养基上， 然后放入28℃培 养箱中生长； 所述制备种子液的过程为： 将活化好的桑黄， 用打孔器打小孔接入CYM液体培养基中， 放入150rpm， 28℃摇床中培 养5～10天。 9.根据权利要求6或7所述的方法， 其特征在于， 所述的乙酸在桑黄液体发酵培养基中 的添加浓度为： 7 ‑10mM； 优选为9.5 0mM。 10.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述乙酸处理的时间为24 ‑95h， 优选为 24‑90h， 最优选为85.5 6h。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115475184 A 2一种提高 桑黄菌丝体中黄酮含量的方 法 技术领域 [0001]本发明属于真菌栽培技术领域， 涉及一种提高桑黄菌丝体中黄酮含量的方法， 具 体是一种在桑黄 菌丝液体发酵 过程中加入适 量的乙酸而提高菌 丝体中黄酮含量的方法。 背景技术 [0002]桑黄(Phellinus  igniarus)是一种珍贵的药用真菌。 黄酮是桑黄主要药用成分之 一， 是含量丰富且 具有重要功效的次级代谢产 物， 其具有抗癌， 抗氧化， 降血脂， 扩张血管的 作用。 研究表明， 桑黄子实体和菌丝体中的黄酮类化合物等活性物质可以起到阻断自由基 链反应及消除自由基的作用， 从而达到抗氧化、 延缓衰 老的功效。 黄酮 类化合物还具有扩张 血管、 保护肝脏、 调节激素、 降低血脂血糖、 提高免疫力和抗菌抗病毒等作用。 人类大肠癌细 胞CX‑1的生长可以被桑黄的黄酮提取物明显抑制， 且随浓度增大抑制作用愈明显。 桑黄黄 酮具有较强的清除ROS的能力， 并能修复被ROS损伤的神经细胞。 已有研究表明桑黄中含有 的黄酮类物质具有良好的抗氧化能力， 能有效地清扫自由基， 阻止脂质的过氧化。 由于黄酮 有多种药用活性， 所以提高桑黄 黄酮含量具有重要意 义。 [0003]由于野生桑黄量很少， 不能满足市场需求， 人工栽培 的方法生产桑黄子实体应运 而生。 目前， 大多通过桑黄液体发酵来生产桑黄液体种子液， 然后用于子实体栽培。 但是许 多研究者 发现菌丝体和子实体的化学成分没有多 大差距， 因此通过液体发酵获得黄酮 类活 性物质是最佳选择。 桑黄菌丝体液体发酵所得黄酮类活性物质的含量并不理想， 因此通过 优化发酵技 术来提高黄酮类活性物质含量显得 尤为重要。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种提高桑黄菌丝体中黄酮含量的方法， 以解决桑黄菌丝 体液体发酵 所得黄酮类活性物质含量较低的问题。 [0005]本发明的目的可以通过以下技 术方案实现： [0006]乙酸在提高桑黄 菌丝体黄酮含量中的应用。 [0007]作为一种优选技术方案： 向桑黄液体发酵培养基中加入乙酸进行处理以提高桑黄 菌丝体中黄酮的含量。 所述的乙酸在桑黄液体发酵培养基中的添加浓度为： 7 ‑10mM； 优选为 9.50mM。 [0008]作为一种优选技术方案， 所述乙酸 处理的时间为24 ‑95h， 优选为24 ‑90h， 最优选为 85.56h。 [0009]所述的乙酸配制成乙酸溶液， 然后通过滤器过滤除菌后加入到桑黄液体发酵培养 基中。 [0010]一种提高桑黄菌丝体中黄酮含量的发酵方法， 向桑黄液体发酵培养基中加入乙酸 进行处理以提高桑黄 菌丝体中黄酮的含量。 [0011]优选的， 该方法具体为： 将桑黄菌种活化后制备种子液， 将种子液接种入桑黄液体 发酵培养基中发酵培养， 发酵过程中向所述的桑黄液体发酵培养基中添加乙酸进 行乙酸处说　明　书 1/5 页 3 CN 115475184 A 3