ICS 11. 220 B 41 中华人民共和国国家标准 GB/T 17999.4—2008 代替GB/T17999.3—1999 SPF鸡 微生物学监测 第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验 SPF chicken—Microbiological surveillance- Part 4: Serum plate agglutination test for SPF chicken 2008-12-31发布 2009-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T17999.4—2008 前言 GB/T 17999《SPF鸡 微生物学监测》分为10个部分： 第1部分：SPF鸡 微生物学监测总则； 第2部分：SPF鸡 红细胞凝集抑制试验； 第3部分：SPF鸡 血清中和试验； 第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验； 第5部分：SPF鸡 琼脂扩散试验； 第6部分：SPF鸡 酶联免疫吸附试验； 第7部分：SPF鸡 胚敏感试验； 第8部分：SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验； 第9部分:SPF鸡 试管凝集试验； 第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验。 本部分为GB/T17999的第4部分。 本部分修订参照了NY/T553—2002《禽支原体病诊断技术》和NY/T536—2002《鸡伤寒和鸡白痢 诊断技术》中的有关规定。 本部分代替GB/T17999.3—1999《SPF鸡血清平板凝集试验》。 本部分与GB/T17999.3—1999相比主要变化如下： 增加了生理盐水作为阴性对照。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口。 本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法 斯家禽有限公司。 本部分主要起草人：曲连东、姜骞、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、 孟庆文。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T17999.3—1999。 SZK SIG GB/T17999.4—2008 SPF鸡微生物学监测 第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验 1范围 GB/T17999的本部分规定了鸡血清平板凝集试验的技术要求。 pullorum）、鸡毒支原体（Mycoplasmagallisepticum）、滑液囊支原体（Mycoplasmasynouiae）副鸡嗜 血杆菌（Haemophilusparagauinarum）。 2原理 血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与下，经过一段时间出现 肉眼可见的凝集现象，常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体 3试剂和材料 3.1试剂 3.1.1凝集抗原。 3. 1. 2阴性血清、阳性血清。 3.1.3被检血清。 3.2材料 玻璃板，移液器（TD10μL～200μL)及吸头。 4操作程序 4.1使用前10min～20 min自冰箱取出抗原、阴性标准血清、阳性标准血清及被检血清，使其达到 室温。 4.2用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴（0.025mL～0.05mL），垂直滴于玻璃板上，然后迅速在 抗原旁边滴加同量的被检血清一滴（0.025mL0.05mL）。 4.3用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1cm～2cm的片状，不断摇动玻璃板，2min内观 察结果。 4.4试验应在20℃~25℃条件下进行 4.5每批试验应设阳性血清、阴性血清及生理盐水对照。 5结果判定 在2min内出现50%（十十）以上凝集者为阳性。2min内不凝集（一）者为阴性，介于上述两者之 间为可疑，进行复核试验，如仍为可疑，判为阳性。凝集判读标准见表1。 1