ICS 65.020.30 B 41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 7238—2020 对虾偷死野田村病毒（CMNV）检测方法 Detection methods for covert mortality nodavirus (CMNV) 行业标准信息服务平台 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 SC/T7238—2020 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 典通 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156)归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。 本标准主要起草人：张庆利、黄健、万晓媛、李小平、刘爽、梁艳、杨冰、邱亮、李晨。 行业标准信息服务平台 SC/T7238—2020 对虾偷死野田村病毒（CMNV）检测方法 1范围 本标准给出了对虾偷死野田村病毒（CMNV）逆转录套式PCR检测、逆转录环介导等温扩增检测、 TaqMan荧光定量RT-PCR检测所需的试剂和材料、器材和设备，规定了操作步骤和结果判定的要求。 本标准适用于CMNV的检测和监测 规范性引用文件 23 凡是不注日期的引用文件 SC/T7103水生 动物 地检疫采 规汇 3缩略语 本灸件 下列缩略语适 用 .BCO BstDNA聚 热启动NA聚合酶（BST usta 田村病 CMNV:偷 Ccoverinlortaliynodavin dNTP:脱氧 二磷酸 deoxyrilonucleoside tn M-MLV配 M 通转录酶（reversetransct ptase MMIVR nested RT PC R.逆转 武PCRneste qRT-PCR 寸装光定 PCRL EPCRCquantitative me RT-LAMP 转录环介 plification) D 4试剂和材料 4.1 RNase-frce 商品化 4. 2 RNAisoPlus 商品 或其他等效 RA提取市 4.3 RNA酶抑制剂 ，或其他等效试剂。 4.4 三氯甲烷：分析纯 4.5 异丙醇：分析纯。 4.6 75%乙醇：见附录A中的A 4.7 阳性对照：感染了CMNV的对虾组织或细胞培养物或含有后的片段的核酸，一80℃保存。 4.8 4. 9 空白对照：可用RNase-free水作为空白对照。 4. 10 0dNTP（各2.5mmol/L)：含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各2.5mmol/L的混合物，一20℃保存。 4. 11 dNTP（各10mmol/L）：含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各10mmol/L的混合物，20℃保存。 4. 12 dNTP（各20mmol/L)：含dATP.dTTP、dCTP.dGTP各20mmol/L，见A.2，一20℃保存。 4.13 M-MLV逆转录酶（200U/uL）：商品化试剂，一20℃保存，或其他等效逆转录酶。 4.145×M-MLV逆转录酶缓冲液：商品化试剂，一20℃保存，或其他等效缓冲液。 4. 15 TaqDNA聚合酶（5U/μL）：商品化试剂，一20℃保存，或其他等效DNA聚合酶。 4. 16 10XPCR缓冲液：商品化试剂，随TaqDNA聚合酶提供，不含Mg+，一20℃保存，或其等效缓 冲液。 1