ICS 65.120 CCS B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T13883—2023 代替GB/T13883—2008 饲料中硒的测定 Determination of selenium in feeds 2024-03-01实施 2023-08-06发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T13883—2023 前言 起草。 本文件代替GB/T13883—2008《饲料中硒的测定》，与GB/T13883—2008相比，除结构调整和编 辑性改动外，主要技术变化如下： 更改了适用范围（见第1章，2008年版的第1章）； a) b) 更改了氢化物发生-原子荧光光谱法的定量限（见第1章，2008年版的第1章）； 氢化物发生-原子荧光光谱法、荧光分光光度法试样溶液制备增加了微波消解法（见4.5.1.2、 5.5.1.2); d) 增加了电感耦合等离子体质谱法（见第6章）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口。 本文件起草单位：国粮武汉科学研究设计院有限公司、长沙兴嘉生物工程股份有限公司、山东新希 望六和集团有限公司、宜宾学院。 本文件主要起草人：黄昌郡、黄逸强、郭团结、王思思、刘小敏、张凤秤、苏勇豪、杨青、洪双胜、 陈梦莹、邵瑞、王永强、钟芳、李勇、秦时聪。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： -1992年首次发布为GB/T13883一1992，2008年第一次修订； 一本次为第二次修订。 GB/T13883—2023 饲料中硒的测定 1范围 本文件描述了饲料中硒测定的氢化物发生-原子荧光光谱法、荧光分光光度法和电感耦合等离子体 质谱法。 本文件中氢化物发生-原子荧光光谱法、荧光分光光度法适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、 添加剂预混合饲料和饲料原料中硒的测定，电感耦合等离子体质谱法适用于配合饲料、浓缩饲料、精料 补充料和饲料原料（矿物质饲料原料除外）中硒的测定。 当取样量为1g、定容体积为50mL时，氢化物发生-原子荧光光谱法、荧光分光光度法的检出限为 0.01mg/kg、定量限为0.02mg/kg；当取样量为0.5g、定容体积为50mL时，电感耦合等离子体质谱法 的检出限为0.01mg/kg、定量限为0.02mg/kg。 2规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T20195动物饲料试样的制备 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4氢化物发生-原子荧光光谱法（仲裁法） 4.1原理 试样经酸消化后，在盐酸介质中，试样消化液中的硒还原成四价硒，用硼氢化钾作还原剂，将四价硒 在盐酸介质中还原成硒化氢，由载气带入原子化器中进行原子化，在硒空心阴极灯照射下，基态硒原子 被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比，与标准系 列比较定量。 4.2 2试剂或材料 警示 各种强酸应小心操作，稀释和取用均在通风橱中进行，使用高氯酸时注意不要烧干，小心 爆炸。 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.2.1水：GB/T6682，二级。 4.2.2硝酸：优级纯。 4.2.3高氯酸：优级纯。 1 GB/T13883—2023 4.2.4 盐酸：优级纯。 4.2.5 氢氧化钠：优级纯。 4.2.6 过氧化氢。 4.2.7 硼氢化钾：优级纯。 4.2.8 混合酸溶液：量取400mL硝酸（4.2.2），与100mL高氯酸（4.2.3）混匀。 4.2.9 盐酸溶液I：量取100mL盐酸（4.2.4），与100mL水混匀。 4.2.10 盐酸溶液Ⅱ：移取5mL盐酸（4.2.4），与95mL水混。 4.2.11 氢氧化钠溶液（5g/L）：称取5g氢氧化钠，用水溶解、定容至1000mL，混匀。 4.2.12 硼氢化钾溶液（20g/L）：称取20g硼氢化钾，溶于1000mL氢氧化钠溶液（4.2.11)中，混匀。 4.2.13 铁氰化钾溶液（200g/L）：称取20g铁氰化钾，溶于100mL水中，混匀。 4.2.14 硒标准储备溶液（100gmL）：准确称取100mg硒粉（CAS号：7782-49-2，光谱纯，纯度不低于 99.9%），溶于少量硝酸（4.2.2）中，加2mL高氯酸（4.2.3），置沸水浴中加热3h~4h，冷却后再加 8.4mL盐酸（4.2.4），再置沸水浴中加热2min，用水移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混勾，于 2℃～8℃保存，有效期3个月。或购买有证标准物质。 4.2.15硒标准中间溶液I（1g/mL）：准确移取1mL硒标准储备溶液（4.2.14）于100mL容量瓶中，加 人2mL盐酸溶液I（4.2.9），用水定容至刻度，混勾。有效期1个月。 4.2.16硒标准中间溶液Ⅱ（100ng/mL）：准确移取10mL硒标准中间溶液I（4.2.15）于100mL容量 瓶中，加入2mL盐酸溶液I（4.2.9），用水稀释至刻度，混匀。临用现配。 4.2.17氩气：纯度不低于99.995%。 4.31 仪器设备 4.3.1 原子荧光光度计。 4.3.2 分析天平：精度0.0001g。 4.3.3 微波消解仪。 4.3.4可调温电炉。 4.3.5可调温电热板。 4.3.6恒温水浴锅。 4.4 4样品 按照GB/T20195规定制备试样，至少200g，配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和饲料原料粉碎，使 其全部过0.425mm分析筛，添加剂预混合饲料粉碎，使其全部过0.25mm分析筛，混合均匀，装人密闭 容器中，备用。 4.5试验步骤 4.5.1试样溶液制备 4.5.1.1湿法消解 平行做两份试验。称取试样2g（添加剂预混合饲料0.5g），精确至0.0001g，置于100mL高型烧 杯中，加入混合酸溶液（4.2.8）15mL（添加剂预混合饲料10mL）及数粒玻璃珠，盖上表面皿，放置12h 以上。置于可调温电热板上逐步加热[加热过程中若发现溶液颜色变深，取下，冷却至室温后补添5mL 混合酸溶液（4.2.8），继续加热]，当溶液上层有大量白烟产生、剩余溶液体积约2mL，取下，冷却至室 温。加人5mL盐酸溶液I（4.2.9），置于可调温电炉上加热至冒烟、剩余体积约2mL,取下，冷却至室 温，用水转移至50mL容量瓶，加人8mL盐酸（4.2.4）、2mL铁氰化钾溶液（4.2.13），用水定容，混匀， 2 GB/T13883—2023 作为试样溶液。同时做空白试验。 4.5.1.2微波消解 平行做两份试验。称取0.5g（精确至0.0001g）试样于聚四氟乙烯内罐中，加入8mL硝酸（4.2.2）， 浸泡10min，然后加人2mL过氧化氢（4.2.6），静置2h以上，盖好安全阀，安装好保护套，将消解罐放 入微波消解仪内，设置微波消解条件（见附录A），进行样品消解。消解结束后，冷却至室温后打开罐盖 排气，用少量水冲洗内盖，洗液并入罐中，放置于可调温电热板上，于150℃继续加热至剩余体积纳 （4.2.4）、1mL铁氰化钾溶液（4.2.13），用水定容，混匀，作为试样溶液。同时做空白试验。 4.5.2标准系列溶液配制 准确移取0mL、0.2mL、0.5mL、2mL、5mL、10mL、20mL硒标准中间溶液Ⅱl（4.2.16），分别置于 50mL容量瓶中，补水至30mL，加入8mL盐酸（4.2.4）、2mL铁氰化钾溶液（4.2.13），用水稀释至刻 度，混匀，配制成质量浓度为0ng/mL、0.4ng/mL、1ng/mL、4ng/mL、1ong/mL、2ong/mL、 40ng/mL硒标准系列溶液。临用现配。 4.5.3仪器参考条件 仪器参考条件如下： a) 负高压：200V~400V； b) 硒空心阴极灯电流：15mA~100mA； c） 原子化器温度：200℃； (P 原子化器高度：8mm； e) 载气流量：400mL/min； f）月 屏蔽气流量：1000mL/min。 4.5.4测定 调节仪器至最佳工作状态，稳定15min～20min开始测量。以盐酸溶液IⅡ（4.2.10）为载流，硼氢化 钾溶液（4.2.12）为还原剂，用载流液连续进样，待荧光强度稳定后，依次测定标准系列溶液、空白试验溶 液和试样溶液的荧光强度，以硒浓度为横坐标、荧光强度为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线相关系数7 不低于0.99，从标准曲线上查得试样溶液中的硒的浓度。若试样溶液中硒的荧光强度超出曲线线性范 围，分取适量试样溶液稀释，并加人适量盐酸（4.2.4）、铁氰化钾溶液（4.2.13），保证稀释后的试样溶液中 盐酸和铁氰化钾浓度与标准系列溶液浓度一致，再重新测定。 注：在测定试剂空白溶液和试样溶液前，用盐酸溶液ⅡI（4.2.10)进样清洗，直至荧光值与试剂空白一致时再进样。 4.6试验数据处理 试样中硒的含量wi以质量分数计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）计算： (pl-p)××1000 w= Xn ....(1) mX1 000X1 000 式中： V一一试样溶液总体积，单位为毫升（mL）； 3 GB/T13883—2023 n一超出标准曲线线性范围后的稀释倍数； m一—试样的质量，单位为克（g）。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留到小数点后两位。 4.7 精密度 在重复性条件下获得的两