中华人民共和国国家标准 GB5009.279—2016 食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、 麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.279—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T22222—2008《食品中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇的测定 高效液相色谱法》。 本标准与GB/T22222—2008相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定”; ———修改了样品前处理方法; ———增加了第二法高效液相色谱-蒸发光散射检测法; ———增加了食品中赤藓糖醇的检测。GB5009.279—2016 1 食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、 麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定 1 范围 本标准规定了口香糖、饼干、糕点、面包、饮料中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇的高效液相色 谱-示差折光检测和蒸发光散射检测测定方法。 本标准适用于口香糖、饼干、糕点、面包、饮料中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇含量的测定。 第一法 高效液相色谱-示差折光检测法 2 原理 试样经沉淀蛋白质后过滤,上清液进高效液相色谱仪,经氨基色谱柱或阳离子交换色谱柱分离,示 差折光检测器检测,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 乙腈(CH3CN):色谱纯。 3.1.2 三氯乙酸(CCl3COOH)。 3.1.3 无水碳酸钠(Na2CO3)。 3.2 试剂配制 3.2.1 三氯乙酸溶液(100g/L):称取10g三氯乙酸,加水溶解并定容至100mL。 3.2.2 碳酸钠溶液(21.2g/L):称取2.12g碳酸钠,加水溶解并定容至100mL,现用现配。 3.3 标准品 3.3.1 木糖醇(C5H12O5,CAS号:87-99-0),纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准 物质。 3.3.2 山梨醇(C6H14O6,CAS号:50-70-4),纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准 物质。 3.3.3 麦芽糖醇(C12H24O11,CAS号:585-88-6),纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标 准物质。 3.3.4 赤藓糖醇(C4H10O4,CAS号:149-32-6),纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准GB5009.279—2016 2 物质。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 标准储备液(40mg/mL):分别称取400mg(精确至0.1mg)木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖 醇标准品,加水定容至10mL,放置4℃密封可贮藏1个月。 3.4.2 标准工作液:分别准确移取各种糖醇标准储备液40μL、60μL、80μL、100μL、120μL、150μL, 加水定容至1mL,配制成质量浓度分别为1.6mg/mL、2.4mg/mL、3.2mg/mL、4.0mg/mL、4.8mg/ mL、6.0mg/mL的混合系列标准工作溶液。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪:具有示差折光检测器。 4.2 色谱柱:氨基色谱柱(内径4.6mm,柱长250mm,粒径5μm)或阳离子交换色谱柱(内径6.5mm, 柱长300mm)。 4.3 食品粉碎机。 4.4 分析天平:感量为0.1mg、0.01g。 4.5 高速离心机:转速≥9500r/min。 4.6 超声波清洗机:工作频率40kHz,功率500W。 5 分析步骤 5.1 试样制备及前处理 5.1.1 口香糖 取口香糖样品至少20g,用刀片切成小碎块,置于密闭的容器内混匀。准确称取2g左右切碎的样 品,置于50mL离心管中,加入40mL水,混匀后置于80℃水浴锅中加热20min,每隔5min振荡混 匀,取出后9000r/min离心10min。取8mL上清液置于10mL容量瓶中,加水定容、摇匀,0.22μm 滤膜过滤后,上机测试。 5.1.2 饮料 对非蛋白饮料类,取样品至少200mL,充分混匀,置于密闭的容器内。称取10g饮料于50mL容 量瓶中,加水定容至50mL,摇匀,0.22μm滤膜过滤后,上机测试。 对蛋白饮料类,取样品至少200g,置于密闭的容器内混匀。称取样品5g,置于50mL容量瓶中, 加入35mL水,摇匀后超声30min,每隔5min振荡混匀,取出后9000r/min离心10min。 沉淀蛋白质:上清液中加入三氯乙酸溶液(100g/L)5mL,摇匀后室温放置30min,9500r/min离 心10min。取8mL上清液于10mL容量瓶中并加水定容,摇匀后取滤液850μL,加入碳酸钠溶液(21.2 g/L)150μL,摇匀中和;或取10mL上清液加入20mL乙腈,摇匀后室温放置30min,9500r/min离 心10min,上清定容至50mL,摇匀。0.22μm的微孔滤膜过滤,上机测试。 注:对糖醇含量较低,经乙腈沉淀稀释后低于检出限的样品,应采用三氯乙酸沉淀。对赤藓糖醇含量较低(≤1%) 的样品,应采用乙腈沉淀。其他情况两种方法均可。 5.1.3 饼干、糕点、面包 取样品至少200g,用粉碎机粉碎,置于密闭的容器内混匀。称取粉碎的样品1g~5g,置于50mL