中华人民共和国国家标准 GB5009.31—2016 食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.31—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.31—2003《食品中对羟基苯甲酸酯类的测定》。 本标准与GB/T5009.31—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定”; ———扩大了对羟基苯甲酸酯类的检测范围,增加了对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丁酯的检测; ———修改了分析步骤中酱油、醋、果汁液体试样称量方式的表述; ———修改了对羟基苯甲酸酯类的标准曲线范围; ———气相色谱法增加了毛细管柱分析测定条件,删除了填充柱分析测定条件; ———增加了食品中对羟基苯甲酸酯类测定方法的定量限; ———修改了计算公式,将计算结果以对羟基苯甲酸酯类计,改为计算结果以对羟基苯甲酸计。GB5009.31—2016 1 食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定 1 范围 本标准规定了食品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁 酯的气相色谱方法。 本标准适用于酱油、醋、饮料及果酱中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、 对羟基苯甲酸丁酯的测定。 2 原理 试样酸化后,对羟基苯甲酸酯类用乙醚提取,浓缩近干用乙醇复溶,并利用氢火焰离子化检测器气 相色谱法进行分离测定,保留时间定性,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。 3.1 试剂 3.1.1 无水乙醚(C2H5OC2H5):重蒸。 3.1.2 无水乙醇(C2H5OH):优级纯。 3.1.3 盐酸(HCl)。 3.1.4 氯化钠(NaCl)。 3.1.5 无水硫酸钠(Na2SO4)。 3.1.6 碳酸氢钠(NaHCO3)。 3.2 试剂配制 3.2.1 饱和氯化钠溶液:称取40g氯化钠(3.1.4)加100mL水充分搅拌溶解。 3.2.2 碳酸氢钠溶液(10g/L):称取1g碳酸氢钠(3.1.6),溶于水并稀释至100mL。 3.2.3 盐酸溶液(1∶1):量取50mL盐酸(3.1.3),用水稀释至100mL。 3.3 标准品 3.3.1 对羟基苯甲酸甲酯(C8H8O3),纯度≥99.8%。 3.3.2 对羟基苯甲酸乙酯(C9H10O3),纯度≥99.7%。 3.3.3 对羟基苯甲酸丙酯(C10H12O3),纯度≥99.3%。 3.3.4 对羟基苯甲酸丁酯(C11H14O3),纯度≥99.7%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 单个对羟基苯甲酸酯类标准储备液(1.00mg/mL):准确称取对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸GB5009.31—2016 2 乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯标准物质各0.0500g于50.0mL容量瓶中,用无水乙醇溶 解并定容至刻度,置4℃左右冰箱保存,可保存1个月。 3.4.2 对羟基苯甲酸酯类标准中间液(100μg/mL):分别准确吸取单个对羟基苯甲酸酯类标准储备液 (3.4.1)1.0mL于10.0mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。临用时配制。 3.4.3 对羟基苯甲酸酯类标准工作液1~5:分别吸取对羟基苯甲酸酯类标准中间液(3.4.2)0.40mL、 1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL于10.0mL容量瓶中,用无水乙醇稀释并定容。此即为4.0μg/mL、 10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100μg/mL的标准工作液1~5的浓度,临用时配制。 3.4.4 对羟基苯甲酸酯类标准工作液6和标准工作液7(200μg/mL、300μg/mL):分别吸取对羟基苯 甲酸酯类标准储备液(3.4.1)2.0mL、3.0mL于10.0mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。临用 时配制。 4 仪器与设备 4.1 气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)。 4.2 天平:感量0.1mg和1mg。 4.3 旋转蒸发仪。 4.4 涡旋混匀器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 试样处理 5.1.1.1 酱油、醋、饮料:一般液体试样摇匀后可直接取样。称取5g(精确至0.001g)试样于小烧杯中, 并转移至125mL分液漏斗中,用10mL饱和氯化钠溶液分次洗涤小烧杯,合并洗涤液于125mL分液 漏斗,加入1mL1∶1盐酸酸化,摇匀,分别以75mL、50mL、50mL无水乙醚提取三次,每次2min, 放置片刻,弃去水层,合并乙醚层于250mL分液漏斗中,加入10mL饱和氯化钠溶液洗涤一次,再分别 以碳酸氢钠溶液30mL、30mL、30mL洗涤三次,弃去水层。用滤纸吸去漏斗颈部水分,将有机层经过 无水硫酸钠(约20g)滤入浓缩瓶中,在旋转蒸发仪上浓缩近干,用氮气除去残留溶剂,准确加入2.0mL 无水乙醇溶解残留物,供气相色谱用。 5.1.1.2 果酱:称取5g(精确至0.001g)事先均匀化的果酱试样于100mL具塞试管中,加入1mL 1∶1盐酸酸化,10mL饱和氯化钠溶液,涡旋混匀1min~2min,使其为均匀溶液,再分别以50mL、 30mL、30mL无水乙醚提取三次,每次2min,用吸管转移至250mL分液漏斗中,加入10mL饱和氯 化钠溶液洗涤一次,再分别以碳酸氢钠溶液30mL、30mL、30mL洗涤三次,弃去水层。用滤纸吸去漏 斗颈部水分,将有机层经过无水硫酸钠(约20g)滤入浓缩瓶中,在旋转蒸发仪上浓缩近干,用氮气除去 残留溶剂,准确加入2.0mL无水乙醇溶解残留物,供气相色谱用。 5.2 仪器参考条件 5.2.1 色谱柱:弱极性石英毛细管柱,柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷,30m×0.32mm (内径),0.25μm(膜厚),或等效柱。 5.2.2 程序升温条件见表1。