ICS 59.140.30 Y 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T30399—2013 皮革和毛皮 化学试验 致癌染料的测定 Leather and fur-Chemical tests- Determination of carcinogenic dyestuffs 2013-12-31发布 2014-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T30399—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、国家皮革质量监督检验中心（浙江）、中 国皮革和制鞋工业研究院、国家鞋类检测中心。 本标准主要起草人：陈学灿、手树禄、陈洪波、赵立国、干玲霞、王晓霞、尹洪雷 I GB/T30399—2013 皮革和毛皮化学试验 致癌染料的测定 1范围 本标准规定了染色皮革、毛皮产品中9种致癌染料及能裂解释放有害芳香胺的分散黄23、分散橙 149染料的测定方法。 本标准适用于染色皮革、毛皮产品。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 QB/T1267 毛皮成品样块部位和标志 QB/T 1272 毛皮成品化学分析试样的制备及化学分析通则 QB/T2706 皮革化学、物理、机械和色牢度试验取样部位 QB/T2716 皮革化学试验样品的准备 3原理 样品经甲醇超声波提取、滤膜过滤后，采用具有二极管阵列检测器的高效液相色谱（HPLC-DAD） 或高效液相色谱-质谱/质谱联用仪（HPLC-MS/MS）测定和确证，外标法定量。 4试剂 除非另有说明，在分析中所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水。 4.1 乙腈，HPLC级。 4.2 甲醇,HPLC级。 乙酸,HPLC级。 4.45%氨水（质量分数）。 4.5 磷酸二氢四丁基铵溶液，0.0025mol/L，用5%氨水（4.4）调节pH至7.5。 4.6 乙酸铵溶液，0.005mol/L，用乙酸（4.3）调节pH至6.0。 4.7 单组分（附录A）标准储备溶液，200mg/L甲醇溶液。 4.8 混合标准溶液，分别移取一定体积的11种致癌染料的标准储备溶液（4.7），置于同一个棕色容量 瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。混合标准溶液的浓度可根据实际需要配制。 5仪器和装置 5.1 管状硬质玻璃提取器，50mL，带旋盖（有聚四氟乙烯垫片）。 GB/T30399—2013 5.2 可控温超声波发生器，输出功率：420W，频率：40kHz，（70土2）℃。 5.3 分析天平，感量：0.1mg。 5.4 一次性注射器，2mL。 聚四氟乙烯薄膜过滤头，0.45μm。 5.6 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（HPLC-DAD）。 5.7 高效液相色谱-质谱/质谱联用仪：配电喷雾离子源（HPLC-MS/MS）。 6试样制备 6.1取样 6.1.1 标准部位取样 6.1.1.1 皮革：按QB/T2706的规定进行。 6.1.1.2 毛皮：按QB/T1267的规定进行。 6.1.2非标准部位取样 如果不能从标准部位取样（如直接从鞋、服装上取样），应在可利用面积内的任意部位取样，样品应 具有代表性，对于毛皮样品，取样过程应避免毛被损失，保持毛被完好，并在试验报告中详细记录取样 情况。 6.2试样的制备 6.2.1皮革：按QB/T2716的规定进行。 6.2.2毛皮：按QB/T1272的规定进行。 6.2.3除去样品上面的胶水、附着物，将试样混匀，装人清洁的试样瓶内待测。 7试验步骤 7.1样品前处理 称取剪碎的试样1g（精确至0.01g）置于玻璃提取器（5.1)）中，加人10.00mL甲醇（4.2）.旋紧盖子 将提取器置于（70士2）℃的超声波发生器（5.2）中处理40min，冷却至室温后，滤膜（5.5）过滤，作为测试 液备用。 7.2 标准工作溶液的制备 将混合标准溶液（4.8）用甲醇配制一系列合适浓度的标准工作溶液。 7.31 HPLC-DAD方法 7.3.1 HPLC-DAD分析条件 由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已 被证明对测试是合适的： a） 色谱柱：ZORBAXEclipseXDB,4.6mmX250mmX5μm，或相当者； b）流动相A：0.0025mol/L磷酸二氢四丁基铵溶液；流动相B：乙腈； c) 柱温：50℃； 2 GB/T 30399—2013 d) 流速：0.6mL/min； e) 检测波长：200nm~900nm； f) 定量波长：380nm，450nm，500nm，540nm和590nm； g) 进样量：20μL； h) 梯度洗脱程序：见表1。 表1梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 递变方式 20 80 线性 0 35 100 0 线性 40 100 0 线性 41 20 80 线性 45 20 80 线性 7.3.2 HPLC-DAD测定 分别取测试液和标准工作液进行HPLC-DAD分析，通过比较试样和标样在规定的检测波长处色 谱峰的保留时间以及光谱图进行定性，以外标法定量。 注：采用7.3.1分析条件，11种染料色谱峰保留时间、色谱图和紫外线可见光谱图参见附录A、附录B和附录C。 7.4HPLC-MS/MS方法 7.4.1HPLC-MS/MS分析条件 由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已 被证明对测试是合适的： a) 色谱柱：EclipsePlusCig，2.1mmX100mmX1.8μm，或相当者； b) 流动相A：0.005mol/L乙酸铵溶液（pH=6.0）；流动相B：乙； c) 柱温：40℃； d) 流速：0.2mL/min； e) 进样量：2μL； f) 梯度洗脱程序：见表2。 g) 离子化模式：电喷雾电离正负离子模式； h) 质谱扫描方式：多反应监测； i) 分辨率：单位分辨率； j) 干燥气温度：325℃； k) 干燥气流量：10L/min； 1) 雾化气压力：2.7X10°Pa（40psi)； m) 其他质谱条件参见附录D。 3